細(xì)胞爬片制備中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

　　蓋玻片與細(xì)胞爬片的區(qū)別

　　材質(zhì)與設(shè)計(jì)?

　　蓋玻片：普通玻璃材質(zhì)，需手動(dòng)剪裁或處理(如酸洗、高壓滅菌)。

　　細(xì)胞爬片：專(zhuān)用玻片，表面經(jīng)TC處理或陽(yáng)離子電荷修飾，可直接貼附細(xì)胞，無(wú)需額外包被。

　　使用場(chǎng)景?

　　蓋玻片：通用性強(qiáng)，但需預(yù)處理，適合簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)。

　　細(xì)胞爬片：專(zhuān)為細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)化，貼壁更牢固，適合免疫熒光、凋亡檢測(cè)等高精度實(shí)驗(yàn)。

　　操作便捷性?

　　蓋玻片：操作繁瑣(如酸洗、滅菌)，易產(chǎn)生氣泡或脫片。

　　細(xì)胞爬片：開(kāi)包即用，減少預(yù)處理步驟，實(shí)驗(yàn)效率更高。

　　細(xì)胞爬片制備步驟

　　玻片處理?

　　酸泡24小時(shí)，流水沖洗，蒸餾水浸泡，高壓滅菌。

　　或用70%乙醇浸泡后火焰烤干(少量玻片)?。

　　細(xì)胞接種?

　　貼壁細(xì)胞：將玻片放入培養(yǎng)皿，接種細(xì)胞懸液，靜置30分鐘?。

　　懸浮細(xì)胞：直接滴加細(xì)胞懸液，靜置4小時(shí)?。

　　固定與保存?

　　4%多聚甲醛固定10-20分鐘，PBS輕柔洗滌。

　　避免干燥，及時(shí)固定或染色?。

　　常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

　　脫片?

　　原因：細(xì)胞附著力差、洗滌過(guò)猛、固定不當(dāng)?。

　　解決：使用多聚賴(lài)氨酸包被玻片，優(yōu)化PBS沖洗方式?。

　　背景高?

　　原因：封閉不充分、抗體濃度過(guò)高?。

　　解決：延長(zhǎng)封閉時(shí)間，調(diào)整抗體稀釋比例?。

　　細(xì)胞貼壁不均?

　　原因：玻片未處理或細(xì)胞密度過(guò)高?。

　　解決：用多聚賴(lài)氨酸包被，控制細(xì)胞密度?。

　　注：以上僅供參考，本試劑僅供科研使用，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。

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