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Alexa Fluor 647-NHS標記反應(yīng)時,NHS 酯水解對標記效率有何影響?

來源:西安凱新生物科技有限公司   2025年12月12日 17:17  

/試劑信息/

CAS號:407627-60-5

中文名稱:AF647-琥珀酰亞胺酯,AF647活性脂

英文名稱:AF647-NHS;Alexa Fluor 647-NHS;

分子量:956.09

分子式:C40H49N3O16S4

外觀:深藍色固體

溶解性:易溶于水、DMSO、DMF等

顏色:Dark purple to black

激發(fā)波長Ex(nm):649

發(fā)射波長Em(nm):671

消光系數(shù):270,000 cm-1M-1

供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司

儲存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復凍融

結(jié)構(gòu)式:

安全防護:

在操作過程中,應(yīng)穿戴一次性防護服、口罩等防護用品,保證自生安全。

注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干

/試劑描述/

Alexa Fluor 647作為一種遠紅外熒光染料,具備高亮度與優(yōu)異的光穩(wěn)定性,其激發(fā)光譜與633nm激光譜線高度適配。在成像及流式細胞分析應(yīng)用中,Alexa Fluor 647染料能夠穩(wěn)定生成信號,同時兼具水溶性以及在pH4至10范圍內(nèi)的非敏感性。盡管該長波長Alexa Fluor染料的熒光超出人眼可見范圍,但可被絕大多數(shù)成像系統(tǒng)輕松捕獲。

/反應(yīng)活性/

NHS酯基團:AF647-NHS中的NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)酯基團是一種高反應(yīng)活性的官能團,能夠與生物分子中的氨基(主要是伯胺)發(fā)生特異性反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

反應(yīng)條件:通常在pH 7.2至8.5的緩沖液中進行,反應(yīng)快速且副產(chǎn)物少。

應(yīng)用:廣泛用于蛋白質(zhì)、抗體、多肽、核酸等生物分子的熒光標記,通過共價連接實現(xiàn)特異性標記和檢測。

/AF647-NHS 標記反應(yīng)時,NHS 酯水解對標記效率有何影響?/

當進行AF647-NHS標記反應(yīng)時,NHS酯發(fā)生水解會對標記效率產(chǎn)生怎樣的影響?NHS酯于水溶液里會逐步水解,水解之后便喪失和氨基發(fā)生反應(yīng)的活性,進而致使標記效率下降。因此在反應(yīng)過程中要把控好反應(yīng)時長,盡可能縮短反應(yīng)體系與水的接觸時長,還能夠適度增加AF647-NHS的使用量,以此彌補因水解產(chǎn)生的損耗。

/相關(guān)試劑/

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以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理

該試劑僅用于科研實驗,不可用于人體



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