研究背景
DNA檢測是法醫(yī)學(xué)中個體識別、親子鑒定等領(lǐng)域的核心技術(shù)。然而,現(xiàn)場提取的DNA樣本往往量少且濃度低,難以直接進行檢測。真空離心濃縮儀作為一種高效的樣本濃縮工具,可以快速去除溶液中的溶劑,將目標(biāo)物質(zhì)濃縮到更小的體積,從而提高DNA濃度,為后續(xù)檢測提供高質(zhì)量的樣本。
常用的 DNA 提取方法包括酚氯仿抽提法、煮沸裂解法、離心柱提取法、磁(硅)珠分離法等,尋找一種能夠獲得高質(zhì)量 DNA 模板的提取方法對于現(xiàn)場檢材的有效檢測具有重要意義。
DNA的提取
細(xì)胞裂解:將含有DNA的細(xì)胞或組織樣本加入裂解緩沖液中,通過化學(xué)或物理方法破壞細(xì)胞膜和核膜,釋放DNA。
去除蛋白質(zhì):加入蛋白酶K等酶解液,消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。
分離DNA:通過加入鹽溶液和有機溶劑(如酚/氯仿),使DNA與蛋白質(zhì)、RNA等分離,DNA溶解在水相中。
DNA沉淀:加入冷乙醇或異丙醇,使DNA從水相中沉淀出來。
DNA洗滌:用70%的乙醇洗滌DNA沉淀,去除鹽分和其他雜質(zhì)。
DNA溶液真空離心濃縮實驗步驟
樣本準(zhǔn)備: 將含有DNA的溶液加入真空離心濃縮儀的樣品管中。
濃縮過程: 啟動儀器,在真空和離心力的共同作用下,溶液中的溶劑迅速蒸發(fā),DNA被濃縮在樣品管底部。
樣本回收: 濃縮完成后,關(guān)閉儀器,取出樣品管,用適量緩沖液重懸DNA,即可用于后續(xù)檢測。
實驗結(jié)果
使用真空離心濃縮儀濃縮后的DNA樣本,濃度顯著提高,且DNA完整性保持良好,用于后續(xù)PCR擴增、測序等檢測要求。
真空離心濃縮儀的優(yōu)勢
高效濃縮: 真空環(huán)境降低溶劑沸點,離心力防止樣本暴沸,實現(xiàn)快速溫和濃縮。
樣本安全: 密閉系統(tǒng)避免樣本交叉污染,低溫操作保護DNA活性。
操作簡便: 自動化程度高,操作簡單,可同時處理多個樣本。
濃縮儀推薦
凈信 真空離心濃縮儀,專為濃縮樣本設(shè)計,具有以下特點:
高效真空系統(tǒng): 快速達(dá)到高真空度,縮短濃縮時間。
精確溫控系統(tǒng): 防止樣本過熱,保護DNA活性。
多種轉(zhuǎn)子選擇: 滿足不同規(guī)格樣品管的濃縮需求。
安全可靠: 具備過溫、過壓等保護功能,確保實驗安全。
免責(zé)聲明