ELISA實驗:酶聯(lián)免疫吸附測定原理與應(yīng)用方向
ELISA的原理和應(yīng)用方向其實很清晰,核心是利用抗原抗體的特異性結(jié)合和酶的高效催化來實現(xiàn)高靈敏度的檢測。下面天正信達幫你梳理一下:
一、ELISA基本原理
固相化?:將抗原或抗體固定在固相載體(如微孔板)表面,保持其免疫活性。
酶標記?:將另一種抗體或抗原與酶(如辣根過氧化物酶HRP)連接,形成酶標復合物,該復合物同時保留免疫活性和酶活性。
特異性結(jié)合?:加入待測樣本,樣本中的目標物(抗原或抗體)與固相載體或酶標復合物發(fā)生特異性結(jié)合。
洗滌分離?:洗去未結(jié)合的物質(zhì),只留下特異性結(jié)合的復合物。
酶促顯色?:加入酶的底物,酶催化底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物,顏色深淺與樣本中目標物濃度成正比。
定量檢測?:用分光光度計測定顏色強度,通過標準曲線計算樣本中目標物的精確濃度。
二、ELISA應(yīng)用方向
ELISA應(yīng)用廣泛,主要包括:
疾病診斷?:檢測病原體或其抗體。
疾病監(jiān)測與普查?:大規(guī)模篩查疾病或檢測人群免疫水平。
法醫(yī)與獸醫(yī)檢測?:用于毒物檢測、動物疫病診斷等。
農(nóng)業(yè)與植物病理學?:檢測植物病原體或轉(zhuǎn)基因成分。
科研與藥物開發(fā)?:定量檢測細胞因子、激素、藥物等生物分子。
三、ELISA主要類型
間接法?:檢測抗體。抗原包被固相板,加入待測抗體,再用酶標二抗檢測。
夾心法?:檢測大分子抗原。先包被捕獲抗體,加入樣本,再用酶標檢測抗體。
競爭法?:檢測小分子抗原或半抗原。樣本抗原與酶標抗原競爭結(jié)合固相抗體。
注意:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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