微生物木質素(Lignin)ELISA檢測試劑盒技術說明書

　　BS-5184微生物木質素(Lignin)ELISA試劑盒

　　1. 產品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，專用于定量檢測微生物發(fā)酵液、細胞裂解液等樣本中的木質素含量。木質素是微生物代謝或降解植物細胞壁過程中產生的芳香族聚合物，其含量變化可反映微生物對木質纖維素的利用效率?。

　　2. 檢測原理

　　固相抗體包被微孔板捕獲樣本中的木質素，再加入酶標記檢測抗體形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。洗滌后加入TMB底物顯色，450nm波長下測定吸光度，吸光度值與木質素濃度呈正相關?。

　　3. 試劑盒組成

　　組分 96孔配置 48孔配置 保存條件

　　微孔酶標板 12孔×8條 12孔×4條 2-8℃密封干燥

　　標準品(木質素) 0.5mL×6管 0.5mL×6管 -20℃避光

　　樣本稀釋液 6mL 3mL 2-8℃

　　酶標抗體-HRP 10mL 5mL 2-8℃避光

　　20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 室溫

　　TMB顯色液 9mL 4.5mL 2-8℃避光

　　終止液 9mL 4.5mL 室溫

　　封板膜 2張 2張 室溫

　　4. 樣本處理

　　4.1 微生物發(fā)酵液

　　8000×g離心10分鐘去除菌體

　　取上清液立即檢測或-80℃凍存(避免反復凍融)

　　4.2 細胞裂解液

　　超聲破碎后12000×g離心15分鐘

　　取上清液用PBS稀釋10倍后檢測

　　4.3 注意事項

　　樣本渾濁需0.22μm濾膜過濾

　　避免使用含疊氮鈉的樣本(抑制HRP活性)

　　5. 實驗步驟

　　5.1 試劑準備

　　洗滌緩沖液：蒸餾水稀釋20倍至1×工作液

　　標準品梯度：按說明書稀釋至0-60μg/mL

　　5.2 加樣

　　標準品/樣本各50μL加入對應微孔

　　37℃孵育30分鐘

　　5.3 洗滌

　　每孔加300μL洗滌液，靜置1分鐘后拍干

　　重復5次

　　5.4 顯色

　　每孔加酶標抗體100μL，37℃孵育30分鐘

　　洗滌后加TMB顯色液90μL，避光15分鐘

　　加終止液50μL終止反應

　　5.5 測定

　　450nm波長測定OD值(參考波長630nm)

　　6. 結果計算

　　以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線。樣本濃度通過曲線方程計算，超出范圍需稀釋后復測。

　　7. 性能指標

　　參數(shù) 指標

　　靈敏度 ≤0.5μg/mL

　　檢測范圍 1-60μg/mL

　　精密度 批內CV<8%，批間CV<12%

　　回收率 85%-115%

　　8. 注意事項

　　試劑盒使用前需室溫平衡30分鐘

　　不同批號試劑不可混用

　　終止液含強酸，操作時佩戴防護裝備

　　顯色液避免接觸金屬離子

　　微量移液器需校準，避免交叉污染

　　9. 有效期

　　6個月(2-8℃保存)

　　10. 聲明

　　本產品僅供科研使用。

　　注：以上僅供參考，本試劑僅供科研使用，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

　　微生物木質素(Lignin)ELISA檢測試劑盒技術說明書 本生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。本生試劑盒